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淺談層析實(shí)驗(yàn)中的氣泡問題(一)

日期:2025-05-08 10:40
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摘要:淺談層析實(shí)驗(yàn)中的氣泡問題(一)
那么下面上海嘉鵬科技有限公司為大家簡單介紹一下淺談層析實(shí)驗(yàn)中的氣泡問題(一):
       說到氣泡,你可能會聯(lián)想到酣暢淋漓的可樂,通透上頭的啤酒,亦或是流光飛舞的浪漫,生活中的氣泡,似乎還帶有那么一絲美好,然而對于實(shí)驗(yàn)來說,尤其是在大多不會配置在線脫氣單元的FPLC系統(tǒng)上做的層析實(shí)驗(yàn),氣泡就如煩人的蒼蠅,鞋里的石子,令人如鯁在喉不吐不快,如若是重要樣品、昂貴填料,氣泡帶來的實(shí)驗(yàn)失敗那簡直是小型災(zāi)難現(xiàn)場。那么氣泡是源自何來,而又去之何處,怎么能讓它們從我們的系統(tǒng)里消失,以下此篇,做一個小小探討,拋磚引玉,共謀對策而滅之。


關(guān)于氣泡來源,正如病從口入,無非就是進(jìn)入系統(tǒng)的開口處:流動相,或者流路中相對負(fù)壓處的漏點(diǎn);如果流動相脫氣不理想或儀器本身連接管路、組件存在問題,流路中將形成肆意妄為的氣泡,引發(fā)一系列問題: 

      1. 組分峰面積變化,峰形變化;
      2. 形成尖峰或鋸齒狀噪聲;
      3. 出現(xiàn)鬼峰 ,基線漂移波動增大;
      4. 泵動作失常,壓力波動,檢測基線全抖;
      5. 填料走空,干柱;
      6. 溶解氧可能氧化樣品組分和(或)流動相及固定相組分,使檢測失真。
實(shí)際案例



Fig.1 氣泡造成的UV雜峰

Fig.2 氣泡造成的系統(tǒng)壓力波動


      這些癥狀基本能覆蓋大部分的層析實(shí)驗(yàn)問題,可見氣泡的破壞力和惱人程度,知己知彼方才能有的放矢,那么氣泡是如何形成的呢?流動相中氣體形成的原因有多種,*根本的還是由于氣體在液體中達(dá)到過飽和狀態(tài);平衡狀態(tài)時溶解空氣的量與溶液的性質(zhì)、氣體的種類有關(guān),也與外界條件有關(guān), 主要的外界條件有以下 3 種。


一般來說,溶劑中能溶解氣體的量隨溫度的升高而降低,而當(dāng)溶劑從低溫狀態(tài)下移至高溫時,過量溶解的氣體以氣泡形式逸出。因此,緩沖液溫度的變化,較易引起氣泡的形成。

● 正如我們配置的緩沖液很多時候會保存于層析柜的低溫環(huán)境,當(dāng)實(shí)驗(yàn)需要使用時從層析柜中取出,在室溫環(huán)境下會帶來溫度的劇烈變化,改變氣體溶解性,進(jìn)而產(chǎn)生氣泡,影響實(shí)驗(yàn),因此緩沖液的使用如果有溫度的變化,需要在實(shí)驗(yàn)溫度下擺放一段時間,釋放氣泡后再使用;
● 如果層析儀器是在非恒溫實(shí)驗(yàn)室,晝夜會有溫差,白天做完實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)保存,經(jīng)歷夜晚的溫度變化,第*二天系統(tǒng)里很可能會出現(xiàn)氣泡,此時實(shí)驗(yàn)之前充分System wash就非常重要,需要使用高流速將系統(tǒng)內(nèi)的氣泡吹掃出來,避免影響實(shí)驗(yàn)。

● 當(dāng)檢測器池處于較高溫度時,池中易產(chǎn)生氣泡,因?yàn)橐毫魍ㄟ^檢測器時,溫度升高而此處的壓力反而減小。如果氣泡形成于檢測器池中,則將出現(xiàn)尖峰狀或鋸齒狀的基線噪聲,甚至于完全無法測定,因此在系統(tǒng)流路中,升溫組件與流路保持相應(yīng)的溫度隔斷,系統(tǒng)流路溫度的均一性,也非常重要。


以上就是上海嘉鵬科技有限公司為大家整理總結(jié)關(guān)于淺談層析實(shí)驗(yàn)中的氣泡問題(一)。

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