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夾芯式垂直電泳槽使用方法

日期:2025-05-04 21:30
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摘要:夾芯式垂直電泳槽使用方法

那么下面上海嘉鵬科技有限公司為大家簡(jiǎn)單介紹一下關(guān)于夾芯式垂直電泳槽使用方法:

  夾芯式垂直電泳槽使用方法:

一、組成部件

(一)裝有鉑金絲的貯液槽一對(duì),配有冷卻裝置及電泳緩沖液流出口。 

(二)凹型橡膠框,配有玻璃板,可分別制作厚度為lmm、1.5mm的凝膠板,操作時(shí)根據(jù)需要選擇適當(dāng)厚度的玻璃板及梳子配套使用。

(三)樣品孔模具(梳子)用于電泳加樣。 

(四)固定貯液槽的螺絲桿及螺母4對(duì),28D、30型為5對(duì)。 

(五)橡膠管五根。兩根長(zhǎng)的用于連接冷卻水的出入口;中等長(zhǎng)度的兩根用于連接電極緩;中液的流出口;*短的一根用于連接貯液槽間的冷卻水。

(六)導(dǎo)線1付。

● 二、使用方法

(一)清洗部件

上述部件組裝前要徹底清洗干凈。尤其是玻璃板及凹形帶槽橡膠框,必須用泡沫海綿沾少許肥皂粉或洗滌劑徹底清洗干凈。清洗后的玻璃板應(yīng)放在玻璃板支架上晾干水后方能使用。

(二)組裝電泳槽

A、1、將四只固定螺桿插到一只貯液框(半上槽)的相應(yīng)孔洞中,然后將貯液框仰放在桌上。

2、左手拿凹型槽橡膠模框,右手的拇指與中指握住玻璃板的兩側(cè)邊緣插到橡膠模框內(nèi) (注意手指不能接觸灌膠面的玻璃板)。

3、將帶有玻璃的橡膠??蜃臃旁谘龇诺馁A液槽框架上,其下緣必須對(duì)齊貯液槽框下緣。

4、雙手拿另一只貯液槽框與仰放在桌上的貯液槽框相合,并使橡膠框上的凸出線位于貯液槽有機(jī)玻璃框中央。

5、裝上四只螺母,擰緊螺絲。注意擰緊螺絲時(shí)用力應(yīng)均勻,*好用雙手按斜角位置雙雙逐漸擰緊。

6、將電泳槽垂直豎起,放在桌上,帶短玻璃板的貯液槽稱上槽(陰極端),帶長(zhǎng)玻璃板的貯液槽稱為下槽(陽極端),在長(zhǎng)玻璃板與橡膠框間有一縫隙。此縫隙可用已熔化的10%瓊脂沿長(zhǎng)玻璃板下端灌入,為防止留存氣泡,可稍抬起一端即可趕去氣泡。待瓊脂完全凝固后才能灌膠。

B、也可將槽垂直豎起,將帶有玻璃的橡膠??蛑苯臃湃氩壑?,對(duì)稱擰緊螺絲后,用瓊脂封底邊。

(三)灌膠

1、先灌分離膠,待凝固后再灌濃縮膠。灌膠前接通冷卻水,夾緊連接上下貯液槽的兩根橡膠管。

2、用細(xì)頭滴管吸取膠液,沿長(zhǎng)、短玻璃板中間縫隙從一端加入膠液。為防止產(chǎn)生氣泡,可稍拾起另一端(氣泡往高處走),不斷加入膠液。若單層膠(分離膠)則加膠量約距離短玻璃板上端0.3厘米處,輕輕加少許水,雙手輕輕將梳子插入,待膠凝后就可形成凹形加樣孔。 

3、為防止漏膠,在上、下貯液槽中立即加入蒸餾水,但蒸餾水不能超過短玻璃板上緣。

4、膠凝固后即可看到樣品槽梳子與凝膠板間有一層折

射率不同的亮區(qū)。

(四)加樣

1、松開連接上、下貯液槽兩根橡皮管上的夾子,放掉槽內(nèi)的蒸餾水,待水流完后,再夾緊夾子。

2、雙手輕輕取出樣品梳子,即可看到界線清楚的加樣孔,將孔中水分吸去(注意千萬不要碰壞孔沿的字面)。

3、在上、下貯液槽中加入緩;中液,液體高度應(yīng)超過上貯液槽短玻璃板上緣。

4、用微量注射器吸取一定量的樣品加到長(zhǎng)、短玻璃板間的凹型凝膠樣品孔內(nèi)(注意加樣動(dòng)作要輕,針頭不能碰壞膠面)。

(五)電泳

一貯液槽導(dǎo)線與電泳儀的負(fù)極相連,下貯液槽導(dǎo)線與電泳儀的正極相連。檢查線路無誤,方可按照所要求的電壓電流進(jìn)行電泳。

(六)取出膠板

電泳結(jié)束,旋松螺母,取出膠框,剝出玻璃板,在兩塊玻璃板下角空隙內(nèi),用刀片背面輕輕撬動(dòng),即可將膠面與一塊玻璃板分開,將有膠板的玻璃板平放在桌上,雙手輕輕沿凝膠底將膠片托起,放在大培養(yǎng)皿中染色,膠板經(jīng)漂洗、脫色后即可看到清晰的分離條帶。

以上就是上海嘉鵬科技有限公司為大家整理總結(jié)關(guān)于夾芯式垂直電泳槽使用方法。

 

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